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    紅細胞溶血試驗(RBC)

 

RBC是一種動物眼刺激試驗的替代方法。通過測定血紅蛋白漏出量及變性程度,確定受試物引起紅細胞50%發生溶血時的受試物濃度(LC50值)和血紅蛋白變性指數(DI,%)計算L/D值(LC50/DI),以L/D值作為評價標準,進行眼刺激性分級,來評價化學品對眼組織細胞的損傷。

   美白祛斑效果評價

 

1  酪氨酸酶活性抑制性能:IC50(酪氨酸酶)——抑制酪氨酸酶50%活性需要的濃度。 

2   黑色素B16細胞活性抑制:IC50(黑色素B16)——抑制黑色素50%活性需要的濃度。

因為酪氨酸酶在黑色素形成最重要的兩步都起關鍵作用,而皮膚的色澤和斑點取決于黑色素的分布。IC為抑制濃度(inhibition concentration)的英文縮寫,兩種IC50互補,IC50(酪氨酸酶)作為原料初步篩選,IC50(黑色素B16)的評價更接近臨床評價。

 A 數值越小,性能越優秀。 

B  兩種IC50但都未考慮原料滲透吸收性能。

C  性能良好的美白原料,這兩個數值都很小,同時原料具備良好的脂溶性和合理的分子量。

           基因表達測試

基因表達(gene expression)是指細胞在生命過程中,把儲存在DNA順序中的遺傳信息經過轉錄和翻譯,轉變成具有生物活性的蛋白質分子?;蟣澩鎘胂赴嘌際醪環旨?,是化妝品原料的安全性、功效性(美白、抗衰老、祛斑、抗過敏等)的重要評價手段。

實驗步驟:復蘇細胞,傳代2~3次,等細胞活性穩定后,根據實驗目的對細胞進行特殊處理(如抗炎用LPS刺激等),用不同濃度的受試物進行工孵育,測定細胞目的基因的表達情況。基因表達測定常用方法有:?RT-PCR,逆轉錄聚合酶鏈式反應,提取細胞RNA,反轉錄,PCR擴增,測定含量;?ELISA,酶聯免疫吸附測定,直接測定蛋白表達量。


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